1、細胞破碎 包括珠磨破碎、壓力釋放破碎、冷凍加壓釋放破碎、化學破碎、機械粉碎等,細胞破碎技術的成熟使得大規(guī)模生產(chǎn)胞內(nèi)產(chǎn)物成為可能。
2、初步純化 各種沉淀法如鹽析法、有機溶劑沉淀、化學沉淀,大網(wǎng)絡樹脂吸附法、膜分離法解決了對熱、PH、金屬離子、有機溶劑敏感的大分子物質(zhì)的分離、濃縮和脫鹽等難題。
3、高度純化 開發(fā)了各類層析技術,如親和層析、疏水層析等,而用于工業(yè)化生產(chǎn)的主要是離子交換層析和凝膠層析。前一種技術是20世紀60年代以后逐漸發(fā)展成為工業(yè)技術的,真正用于生物大分子的他離是20世紀70年代以后各種類型的弱酸、弱堿型離子交換樹脂,如DEAE-葡聚糖等材料商品化后才有了迅速的發(fā)展。凝膠層析技術的工業(yè)應用是20世紀80年代才實現(xiàn)的。
4、成品加工 主要是干燥與結(jié)晶。對于生物活性物質(zhì),可根據(jù)其熱穩(wěn)定性的不同分別采用噴霧干燥、氣流干燥、沸騰床干燥、冷凍干燥等技術。其中冷凍干燥技術在蛋白質(zhì)產(chǎn)品的干燥上廣為應用,但其能耗高、設備復雜、操作時間長,因此有待完善和改進;結(jié)晶技術實現(xiàn)了工業(yè)化生產(chǎn)。
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