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鏈霉親和素包被的磁性微球的結(jié)合能力重要因素 | |||
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鏈霉親和素包被的磁性微球的結(jié)合能力的一個(gè)重要因素,對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用,具有最高的總的結(jié)合通常是最好的,其他變量起著重要的作用。結(jié)合能力測(cè)量,因?yàn)樵诮o定的結(jié)合的標(biāo)記物的微球中的每單位重量的重%的固體的懸浮液中,這些被提供獲得他們真正的結(jié)合能力是很重要的。在設(shè)計(jì)的任何試驗(yàn)之前,我們建議百分比重量分析測(cè)量,以確保測(cè)量的%固體%固體與文??獻(xiàn)報(bào)道的相一致。圖5顯示了差異,我們發(fā)現(xiàn)幾家領(lǐng)先供應(yīng)商提供的材料在我們的實(shí)驗(yàn)室。
圖。涉及的變量在確定鏈霉親和素包被的磁性微球的結(jié)合能力:(一)相對(duì)總結(jié)合和非特異性結(jié)合能力的微球從幾個(gè)供應(yīng)商的供應(yīng)商報(bào)告的%固體(R),根據(jù)實(shí)驗(yàn)確定(重量)%的固體(EX);(二)添加和優(yōu)化吖啶標(biāo)簽,以減少非特異性結(jié)合阻斷劑的效果。
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同樣地,總的結(jié)合可以被分類的特異性和非特異性的約束力。前者是指通過(guò)鏈霉親和素債券生物素配體連接,而后者是指連接的配體,通過(guò)其他一些機(jī)制的正常疏水性吸附在顆粒表面(見圖5)。通過(guò)設(shè)計(jì),使這兩種類型的綁定可以測(cè)量的結(jié)合容量的測(cè)定,可以使用各種類型的阻斷分子的優(yōu)化,以減少非特異性結(jié)合。
鏈霉親和素包被的磁性微球在免疫學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域,提供更傳統(tǒng)的固相支持的幾個(gè)優(yōu)勢(shì)。但是,使用這種類型的固體支持物的最大,重要的是要首先保證的結(jié)合能力,其特征在于最終的應(yīng)用程序?qū)⒆罱K使用的配位體的類型(大小和分子量)。果然,使得這種類型的固相支持物所涉及的技術(shù),擁有先進(jìn)的,所以用來(lái)描述他們的檢測(cè)的靈敏性和簡(jiǎn)便性。由于免疫已從放射性酶促化學(xué)發(fā)光檢測(cè),結(jié)合容量檢測(cè)緊隨其后。
我們?cè)噲D在這篇文章中的壓力點(diǎn),一旦做出選擇的基礎(chǔ)上的免疫鏈霉親和素包被的磁性微球,重要的是要選擇微正在開發(fā)的檢測(cè)系統(tǒng)的基礎(chǔ)上他們的表現(xiàn)。變量影響性能不僅是總的結(jié)合,但結(jié)合分子的空間位阻的特性相類似的分子,將被用于在實(shí)際的測(cè)定。如果這個(gè)信息是不是可以從制造商,這里描述的檢測(cè)可以用于適當(dāng)?shù)谋碚?。另外,在目前市?chǎng)上的鏈霉親和素包被的磁性微球的基礎(chǔ)顆粒的特性變化很大。在開發(fā)這些綁定容量的檢測(cè),我們看了在顆粒從多家供應(yīng)商,并作出比較,不僅基于總的結(jié)合,但如非特異性結(jié)合的特點(diǎn),易于操作(如何迅速,他們可能被拉到一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的磁鐵),測(cè)量與報(bào)告的固體%,依此類推。我們認(rèn)為這些因素是至關(guān)重要的,以確保選擇的試劑是真正的最好選擇一個(gè)特定的應(yīng)用程序。
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約瑟夫·達(dá)菲,約翰V.墻,和瑪麗B.梅薩是在劉海實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員(漁民)的成員。勞拉J. Jenski,博士,生物學(xué)教授在美國(guó)印第安納大學(xué) - 普度大學(xué)(印第安納波利斯)。
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