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MAR感應(yīng)技術(shù)測(cè)量分析區(qū)域的免疫測(cè)試 | |||
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MAR技術(shù)除其檢測(cè)方法,沒(méi)有多大差別,從目前的橫流分析的基礎(chǔ)上明顯的標(biāo)簽,如單分散乳膠懸浮液,膠體金溶膠,或膠體碳。感應(yīng)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是,這項(xiàng)技術(shù)可適應(yīng)任何目前使用的側(cè)流檢測(cè)的測(cè)定形式??乖涂贵w可以結(jié)合起來(lái),形成一個(gè)簡(jiǎn)單的快速檢測(cè)的方法,該方法是適用于范圍廣泛的分析物的定性,半定量和全定量測(cè)定格式,無(wú)論是作為捕捉或夾心測(cè)定.橫流測(cè)定的許多格式,在市場(chǎng)上取得了一些成功利用反射率或基于熒光的檢測(cè)系統(tǒng)。雖然這些格式各有優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn),通常反復(fù)出現(xiàn)的問(wèn)題,包括有限的動(dòng)態(tài)范圍,重現(xiàn)性困難,信號(hào)淬火,光散射或反射濕膜,讀卡器開(kāi)發(fā)成本高,讀者本身的實(shí)際成本。
MAR系統(tǒng)已被設(shè)計(jì)和演示,克服了許多這些問(wèn)題,使用的各種磁性顆粒。在典型的測(cè)量的情況下,使用的各種磁性顆粒,原型設(shè)計(jì)有一到三個(gè)毫伏的背景,四個(gè)數(shù)量級(jí)的動(dòng)態(tài)范圍。裸露的硝酸纖維素膜和大多數(shù)塑料具有較低的背景,用范圍相同,也可以在儀器附近背景。讀出標(biāo)準(zhǔn)的再現(xiàn)性是98%以上更好。這種低的錯(cuò)誤率,得到在25 pg的鐵的Fe 3 O 4的最小檢測(cè)水平帶信號(hào)與噪聲之比為3:1。
顯示的幾個(gè)合作的可行性免疫試驗(yàn)中的標(biāo)簽使用磁性納米粒子作為量子曾參與設(shè)計(jì)。美國(guó)海軍的生物國(guó)防研究局開(kāi)發(fā)了五個(gè)實(shí)驗(yàn)使用的測(cè)試和磁性標(biāo)簽。4待測(cè)物為金黃色葡萄球菌腸毒素B 土拉弗朗西斯菌的細(xì)菌細(xì)胞碎片。金黃色葡萄球菌腸毒素B測(cè)定表明10 FG / ml的靈敏度與優(yōu)于3:1的信號(hào)噪聲比。檢測(cè)細(xì)菌低于30個(gè)菌落形成單位/ ml也得到了證實(shí)。Binax(波特蘭,ME)中的另一種協(xié)作使用的模型抗體系統(tǒng)(犬心絲蟲(chóng))表明100-pg的靈敏度和4%的CV,使用磁性標(biāo)簽系統(tǒng)的能力產(chǎn)生的免疫層析試驗(yàn)。
兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)還審議了BioDot公司(加利福尼亞Irvine)的基本可行性。在第一個(gè)系統(tǒng)是基于一個(gè)共同的病毒抗原,而第二個(gè)是專(zhuān)為肌紅蛋白的檢測(cè)。兩人都是夾心法格式。用現(xiàn)有的材料和處理方法,主要目的是要以確定它是否是可能的,以產(chǎn)生重現(xiàn)性好,可量化的結(jié)果,在一個(gè)系統(tǒng)中有足夠的靈敏度,根據(jù)目前可用的檢測(cè)系統(tǒng),以滿(mǎn)足或改善(請(qǐng)參閱圖7和8)。
BioDot研究旨在探討一些潛在的問(wèn)題,圍繞這個(gè)平臺(tái)。這些關(guān)注集中于測(cè)量技術(shù)的靈敏度和欲望,使整個(gè)系統(tǒng)的真正的定量。主要關(guān)注的是橫流的格式本身。由于的極端靈敏度和重復(fù)性的測(cè)量工具,問(wèn)題是,是否在材料和性能的變化與多種來(lái)源的橫流系統(tǒng)可以產(chǎn)生一個(gè)信號(hào),重現(xiàn)性好,不夠準(zhǔn)確,做到公正測(cè)量系統(tǒng)。產(chǎn)生變化的主要潛在來(lái)源分析有以下幾個(gè)方面值得關(guān)注:順磁性粒子系統(tǒng),共軛墊系統(tǒng),膜系統(tǒng),試劑沉積系統(tǒng),物理法格式。
順磁粒子系統(tǒng)粒子在這個(gè)應(yīng)用程序中使用的標(biāo)簽必須有一個(gè)明確定義的特性。所述顆粒必須具有的磁存儲(chǔ)器可以忽略不計(jì),以避免不穩(wěn)定的共軛。的粒徑分布必須是小的,并且必須是一致的,和量化,以確保信號(hào)的再現(xiàn)性的Fe 3 O 4的內(nèi)容。的Fe 3 O 4基體材料的比例會(huì)影響兩個(gè)檢測(cè)靈敏度和綴合過(guò)程中使用的分離技術(shù)。
此外,在系統(tǒng)中生成的信號(hào),該信號(hào)是粒子半徑的立方成正比,假定一個(gè)恒定的Fe 3 O 4的含量,所以即使是小顆粒尺寸的變化理論上可以有一個(gè)顯著的信號(hào)強(qiáng)度的影響。粒子電荷密度也必須是一致的。在實(shí)踐中,一些來(lái)源能夠提供一致的電荷密度和Fe 3 ? 4含量的顆粒大小一致的超順磁性粒子。生成結(jié)果后,使用130納米的顆粒具有鐵含量在0.37-0.43毫克/毫升的范圍內(nèi)。
共軛片系統(tǒng),為了實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定和足夠的釋放的共軛結(jié)合物墊,墊預(yù)處理,共軛物的沉積和干燥必須是高效的和一致的。據(jù)預(yù)計(jì),沉積法和共軛墊材料的選擇將是成功的系統(tǒng)具有相當(dāng)?shù)闹匾?,因此,一些共軛墊的釋放特征及我國(guó)進(jìn)行了檢查(見(jiàn)表I)。
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