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		在低資源設(shè)置評(píng)估HIV病毒載量

　　以下三個(gè)通用的方法是目前檢測(cè)和量化HIV RNA逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR），核酸序列的擴(kuò)增（NASBA）和支鏈的DNA（BDNA）的發(fā)展中經(jīng)濟(jì)體。每個(gè)方法都需要三個(gè)步驟：樣品制備和病毒核酸提取，擴(kuò)增的靶核酸序列，或從目標(biāo)病毒RNA的檢測(cè)信號(hào)產(chǎn)生，檢測(cè)和/或定量的擴(kuò)增產(chǎn)物。

　　RT-PCR使用反向轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)換成互補(bǔ)DNA（cDNA）的，然后復(fù)制，從而可以檢測(cè)到病毒RNA。在該方法中，RT-PCR量化艾滋病毒的RNA，使病毒載量的測(cè)定。

　　NASBA法是一種等溫?cái)U(kuò)增方法，其中被放大的靶RNA一個(gè)三酶系統(tǒng)，通過競(jìng)爭(zhēng)性共擴(kuò)增控制定量。這種方法不再需要為熱穩(wěn)定的酶和熱循環(huán)用于RT-PCR所使用的工具目前，以下四個(gè)市售的病毒載量測(cè)定的所有使用這些通用的方法之一：羅氏分子系統(tǒng)，實(shí)時(shí)HIV-1由Abbott實(shí)驗(yàn)室，Versant的HIV-1 RNA 1.0試驗(yàn)（KPCR COBAS AmpliPrep和COBAS TaqMan探針2.0）西門子醫(yī)療診斷和生物梅里埃的NucliSENS EasyQ HIV-1 V2.0 4,6COBAS TaqMan探針HIV-1 COBAS TaqMan探針HIV-1檢測(cè)是在體外核酸

　　擴(kuò)增檢測(cè)HIV-1 RNA人血漿中科瓦斯AmpliPrep儀器的自動(dòng)化樣品處理和COBAS TaqMan探針分析儀或COBAS TaqMan探針48分析儀自動(dòng)化擴(kuò)增和檢測(cè)的定量分析。這是一個(gè)完全自動(dòng)化的，實(shí)時(shí)PCR系統(tǒng)目標(biāo)gag和LTR區(qū)的HIV基因組，這會(huì)導(dǎo)致在檢測(cè)下限。

　　的COBAS TaqMan探針HIV-1的檢測(cè)只需要若干技術(shù)，具有很寬的動(dòng)態(tài)范圍，是完全自動(dòng)化的（包括樣品轉(zhuǎn)移），并進(jìn)行分析，只需要一個(gè)單間，但它也有一些缺點(diǎn)。為了執(zhí)行COBAS TaqMan探針HIV-1檢測(cè)，都需要一些專門的實(shí)驗(yàn)室空間和設(shè)備，適中的技術(shù)支持是必不可少的。該設(shè)備也是昂貴的，通常是可望而不可及的任何發(fā)展中世界的設(shè)施，可提供空間和支持。

　　實(shí)時(shí)HIV-1。雅培實(shí)時(shí)HIV-1檢測(cè)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR，但不像TaqMan探針，它的目標(biāo)是POL艾滋病毒基因組的整合區(qū)域。HIV RNA定量是一個(gè)自動(dòng)化的過程使用m2000sp樣品制備和核酸提取，擴(kuò)增和檢測(cè)m2000rt 雅培實(shí)時(shí)檢測(cè)的6個(gè)

　　主要優(yōu)勢(shì)包括其高吞吐量，動(dòng)態(tài)范圍大，而事實(shí)上，它可以是一個(gè)完全自動(dòng)化的，在PCR過程中的封閉系統(tǒng)。此外，該設(shè)備可用于評(píng)估HIV以外的其他病原體。然而，作為的COBAS TaqMan探針的，這個(gè)系統(tǒng)需要專用設(shè)備和空間，良好的技術(shù)支持，并有相當(dāng)?shù)慕鹑谕顿Y。

　　Versant的HIV-1 RNA 1.0 Versant的HIV-1 RNA 1.0檢測(cè)（BDNA）是一個(gè)自動(dòng)化的檢測(cè)，還針對(duì)HIV基因組的的聚合酶整合區(qū)域，再次使用的樣品準(zhǔn)備模塊和擴(kuò)增/檢測(cè)模塊。

　　Versant的實(shí)驗(yàn)也有高吞吐量和可以完全自動(dòng)化，降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)較PCR。沒有特定的實(shí)驗(yàn)室或需要單獨(dú)提取區(qū)域，的設(shè)備，也可用于評(píng)估其它病原體。然而，Versant面向檢測(cè)的主要缺點(diǎn)包括需要熟練的技術(shù)人員，良好的技術(shù)支持和財(cái)力。的NucliSENS EasyQ。的NucliSENS EasyQ HIV-1 V2.0使用NASBA艾滋病毒的擴(kuò)增和定量目標(biāo)gag區(qū)RNA（見表一）。此法的夫婦NASBA利用分子信標(biāo)利用的NucliSENS EasyQ分析儀實(shí)時(shí)檢測(cè)。NucliSENS EasyQ檢測(cè)提供了高吞吐量的優(yōu)勢(shì)，只有中等技能要求。它也是一個(gè)完全自動(dòng)化的，封閉的系統(tǒng)。但是，它需要專門的空間和設(shè)備，在高容量的實(shí)驗(yàn)室的污染是有風(fēng)險(xiǎn)的。技術(shù)支持是必需的，加入已經(jīng)用這個(gè)方法成本高。

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