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實驗室程序樣品制備的質(zhì)量影響結(jié)果的質(zhì)量 | |||
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因此,重要的是,技術(shù)人員注意細(xì)節(jié),構(gòu)成良好的實驗室實踐在幻燈片準(zhǔn)備和染色。 使用自動stainers可以提高結(jié)果的一致性。 接口與埃西斯開始當(dāng)技術(shù)員加載幻燈片組,每組4到航空公司專門設(shè)計的下滑。 技術(shù)員的地方多達(dá)25運(yùn)營商(100幻燈片)陷入無人值守的系統(tǒng)分析(見圖2)。當(dāng)技術(shù)員介紹滑入系統(tǒng),條形碼棒連接到鍵盤用來掃描條形碼的幻燈片。 條形碼標(biāo)識出現(xiàn)在監(jiān)控和污漬的技術(shù)員表示已使用和分析運(yùn)行在下滑。 通過這種方式,不同的污漬和在任何滑跑測試可以自由地混雜在一起。
一旦所有的幻燈片加載,系統(tǒng)開始運(yùn)行。 作為一個幻燈片,一個內(nèi)部條形碼掃描器識別它。 然后電腦將自動顯微鏡掃描滑動,同時內(nèi)部的相機(jī)拍出來的相片重疊整個幻燈片,包括600 - 1000年個人顯微鏡領(lǐng)域。 接下來,計算機(jī)將圖像縫合在一起成一個單一的數(shù)字圖像。 每個相框的位置是已知的,因為埃西斯有一個準(zhǔn)確的鏡臺。 這能夠查看整個幻燈片內(nèi)容改善人工顯微鏡檢查的缺陷,一個病理學(xué)家必須移動幻燈片在舞臺上用手,可能錯過它的一部分。自動顯微鏡奧林巴斯4倍,10倍、20倍,40 x,x 60干燥的目的。 3-chip索尼相機(jī)設(shè)置以每秒60幀,逐行掃描方式消除振動噪聲。 自動對焦與任何顯微鏡物鏡允許無人操作。 翻譯階段移動幻燈片在三軸運(yùn)動,掃描幻燈片在x,y和z軸的焦點(diǎn)。標(biāo)準(zhǔn)品
電腦可以升級為最佳操作。 當(dāng)前配置使用雙重奔騰III 800 - MHz處理器和18 - 72 -千兆字節(jié)SCSI硬盤,512 mb內(nèi)存,和Windows NT 4.0工作站。 一個不間斷電源允許系統(tǒng)有序關(guān)閉,保護(hù)幻燈片上的標(biāo)本的失敗的力量。掃描幻燈片和建設(shè)數(shù)字圖像的時候,電腦使用抓幀器從照相機(jī)捕捉單個幀,訂餐,顏色閾值適用于他們通過將圖像轉(zhuǎn)換為hue-saturation-intensity空間。計算機(jī)分析框架,運(yùn)用模式識別算法消除或排除無關(guān)的對象。 在應(yīng)用模式識別算法,計算機(jī)應(yīng)用的形態(tài)學(xué)算法,確定區(qū)域,長度、形狀、和這些參數(shù)進(jìn)一步描述細(xì)胞的組合。
自最終分析取決于病理學(xué)家而不是儀器,識別可能的利益細(xì)胞的不同的標(biāo)準(zhǔn)將是慷慨的。 任何可能的系統(tǒng)使得一個形象是積極的,那么病理學(xué)家接受或拒絕圖像基于臨床經(jīng)驗和訓(xùn)練。 在組織的應(yīng)用程序中,電腦商店的整個組織。審查。 幻燈片的內(nèi)部處理后,病理學(xué)家評論17-in收集到的圖像和定量信息。 平板電腦顯示器(分辨率1280 x 1280,最好的光學(xué)分辨率大約是0.0625?m 2 每像素160 x 120每視野?m;見圖3)。
這個過程有所不同,基于非純組織組織的應(yīng)用程序和應(yīng)用程序。 non-solid-tissue-based應(yīng)用程序中,如檢測和表征目標(biāo)細(xì)胞在骨髓,埃西斯掃描幻燈片低倍鏡下識別和計數(shù)目標(biāo)感興趣的細(xì)胞使用顏色。 懷疑細(xì)胞的位置存儲為后續(xù)表征放大更高。 細(xì)胞被重新放大并具有額外的顏色和更高的形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。 數(shù)字圖像的收集細(xì)胞病理學(xué)家存儲以供稍后查看。在組織的應(yīng)用程序,如評價HER2的彩色幻燈片致癌基因表達(dá),埃西斯系統(tǒng)產(chǎn)生一個組織學(xué)reconstruction-a整個組織的“衛(wèi)星視圖”一節(jié)。 病理學(xué)家選擇感興趣的區(qū)域組織重建的進(jìn)一步分析。 選定的區(qū)域出現(xiàn)在高放大監(jiān)控的多畫面顯示。 圖4顯示了病人的圖像幻燈片在分析顯示在屏幕上。
病理學(xué)家檢查高倍率圖像并選擇一個或多個條件進(jìn)行詳細(xì)地分析。 埃西斯立即計算每個像素的發(fā)色體顏色,將像素計數(shù)染色強(qiáng)度,提出了一種分?jǐn)?shù)。 處理器可以區(qū)分256增加的強(qiáng)度為特定的顏色。 系統(tǒng)將分?jǐn)?shù)轉(zhuǎn)換,提出了一個連續(xù)體,從0.0到4.0,與定量在零點(diǎn)幾單元。 積極染色細(xì)胞的百分比也報道,在適用情況下)。 換句話說,系統(tǒng)可以提供導(dǎo)致特定測量最常用的格式。
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