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黃曲霉毒素m1污染主要存在于生活中m1的檢測方法 | |||
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黃曲霉毒素主要存在于霉變的花生、谷物、果仁和大米等食物中;在水中的溶解范圍為10毫克/升~20毫克/升,可大量溶解于氯仿、甲醇、二甲基亞砜等中等極性的有機溶劑中,不溶于己烷、石油醚和乙醚;易被堿或強氧化劑破壞;進入人體后主要經(jīng)消化道吸收,大部分分布在肝臟、腎臟,少部分分布在血液、肌肉、脂肪組織中,其在體內(nèi)的代謝過程主要為羥基化作用、去甲基作用和環(huán)氧化作用。(“只要發(fā)霉,就會有黃曲霉毒素。”知名食品安全專家董金獅告訴《羊城晚報》記者,黃曲霉是一種常見霉菌,廣泛存在于自然界,潮濕易發(fā)霉的植物和食品中都會存在。)黃曲霉毒素檢測方法
其實黃曲霉毒素(AFT)是一類化學結構類似的化合物,均為二氫呋喃香豆素的衍生物。它是20世紀60年代初發(fā)現(xiàn)的一種真菌的有毒代謝產(chǎn)物,由曲霉屬中的黃曲霉和寄生曲霉所產(chǎn)生。1993年黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織(WHO)的癌癥研究機構劃定為1類致癌物,它的毒性極強,對人及動物肝臟組織有破壞作用,嚴重時可導致肝癌甚至死亡。近年來,AFB1污染事件的發(fā)生,已引起世界各國及消費者對食品安全的關注[1-3]。世界各國對黃曲霉毒素的檢出標準都做了嚴格的規(guī)定。1995年,世界衛(wèi)生組織制定的食品黃曲霉毒素最高允許濃度為15ug/kg.?因此,對AFT的檢測不僅關系到動物的安全,更直接影響到人們的身體健康和生命安全。中藥對照品
而黃曲霉毒素M1屬于黃曲霉毒素一類結構相似的化合物中的一種,在濕熱地區(qū)食品和飼料中出現(xiàn)黃曲霉毒素的機率最高。物理化學性質(zhì)相當穩(wěn)定,不被巴氏消毒法破壞。哺乳類動物攝入被黃曲霉毒素B1污染的飼料或食品后,通過羥基化作用轉(zhuǎn)化成黃曲霉毒素M1。黃曲霉毒素M1危害主要表現(xiàn)在致癌性和致突變性,對人及動物肝臟組織有破壞作用,可導致肝癌甚至死亡。化學對照品
黃曲霉毒素M1的檢測方法本法系用高效液相色譜法(附錄 VI D)測定藥材及制劑中的黃曲霉毒素(以黃 曲霉毒素 B1、B2、G1 和 G2 總量計) ,除另有規(guī)定外,按下列方法測定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-乙 腈-水(40:18:42)為流動相,■流速每分鐘 0.8ml■【刪除】 ;采用柱后衍生法檢測, (1) 碘衍生法:衍生溶液為 0.05%的碘溶液(取碘 0.5g,加入甲醇 100ml 使溶 用水 稀釋至 1000ml 制成) ,衍生化泵流速每分鐘 0.3ml,衍生化溫度 70℃;■(2)光化 學衍生法: 光化學衍生器 (254nm)■ ; 以熒光檢測器檢測, 激發(fā)波長 λex =360nm(或 【增訂】 365nm),發(fā)射波長 λem =450nm。兩個相鄰色譜峰的分離度應大于 1.5。 混合對照品溶液的制備 精密量取黃曲霉毒素混合標準品 (黃曲霉毒素 B1、 2、 B G1、G2 標示濃度分別為 1. 0?0?8g/ml、0.3?0?8g/ml、1.0?0?8g/ml、 0.3?0?8g/ml、 )0.5ml,置 10ml 量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,作為儲備液。精密量取儲備液 1ml,置 25ml 量瓶中, 用甲醇稀釋至刻度,即得。 供試品溶液的制備 取供試品粉末約 15g(過二號篩),精密稱定,加入氯化鈉 3g,置于均質(zhì)瓶中,精密加入 70%甲醇溶液 75ml,高速攪拌 2 分鐘(攪拌速度大于 11, 轉(zhuǎn)/分) 離心 5 分鐘 000 , (離心速度 2500 轉(zhuǎn)/分) 精密量取上清液 15ml, 50ml , 置 量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,用微孔濾膜(0.45?0?8m)濾過,量取續(xù)濾液 20.0ml, 通過免疫親合柱■(AflaTest@P)■【刪除】 ,流速每分鐘 3ml,用水 20ml 洗脫,洗脫液 棄去,使空氣進入柱子,將水擠出柱子,再用適量甲醇洗脫,收集洗脫液,置 2ml 量瓶 中,并用甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。 測定法 分別精密吸取上述混合對照品溶液 5?0?8l、10?0?8l、15?0?8l、20?0?8l、25?0?8l,注 入液相色譜儀,測定峰面積,以峰面積為縱坐標,進樣量為橫坐標,繪制標準曲線。 另精密吸取上述供試品溶液 20~25?0?8l,注入液相色譜儀,測定峰面積,從標準曲線 上讀出供試品中相當于黃曲霉毒素 B1、B2、G1、G2 的量,計算,即得。 【附注】 (1)本實驗應有相應的安全、防護措施,并不得污染環(huán)境。 (2)殘留有黃曲霉毒素的廢液或廢 玻璃器皿,應置于專用貯存容器(裝有 10%次氯酸鈉溶液)內(nèi),浸泡 24 小時以上,再用清水將玻璃器皿沖洗干凈。相關閱讀:黃曲霉毒素致突變性、致癌和致畸性
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