單組分TMB顯色液, 過(guò)氧化物酶底物
Product Name: 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine (TMB) Liquid Substrate System for ELISA
別名:單組分TMB顯色液 ;單組分TMB過(guò)氧化物酶底物液
介紹: 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine (TMB)是一種過(guò)氧化物酶底物,用于ELISA 反應(yīng)。底物產(chǎn)生一種可溶性淡藍(lán)色的末端產(chǎn)物,可在370 或 655 nm在分光光度計(jì)上讀取。TMB反應(yīng)可以用2 M H2SO4 (產(chǎn)生黃色)終止,450 nm讀取。 使用方法 使用之前,以超純水反復(fù)洗滌的適當(dāng)容器,倒出適量單組分TMB底物溶液,待溶液達(dá)到室溫即可使用。 加液:加完HRP結(jié)合物并溫育一定時(shí)間后,洗板3-5次,每孔加TMB底物100-150uL, 37°C溫育15-30分鐘。 終止(備選):加等體積的1N的HCl或者2N的H2SO4來(lái)終止反應(yīng)。酶標(biāo)孔中反應(yīng)液從藍(lán)色變?yōu)辄S色。 讀數(shù):終止反應(yīng)后,30分鐘內(nèi)在450nm處讀數(shù)。不加終止液,顯色更加穩(wěn)定,可以在620-650nm處讀數(shù)。 注意: 降低底物強(qiáng)度:如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景和/或沉淀,表明TMB底物反應(yīng)過(guò)于強(qiáng)烈。為了避免產(chǎn)生沉淀,可以在加入終止液后馬上讀數(shù);另外,可以進(jìn)一步稀釋一抗和/或HRP結(jié)合物。為了降低非特異性背景顏色,推薦進(jìn)一步降低一抗和/或HRP結(jié)合物的濃度,盡量避免降低底物濃度。動(dòng)力學(xué)檢測(cè):TMB單組分底物在與過(guò)氧化物酶反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生一種藍(lán)色,可以在加底物后620-650nm處讀數(shù),不需終止反應(yīng)。 穩(wěn)定性:2-8°C條件下,大于18個(gè)月。 敏感性:相當(dāng)于顯色AB雙液,或
用途: TMB因其靈敏度較高及無(wú)致癌性而得到廣泛應(yīng)用。單組分TMB過(guò)氧化物酶底物與辣根過(guò)氧化物酶連接物反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生一種深藍(lán)色的產(chǎn)物,適用于定量以及定性分析的酶聯(lián)免疫分析當(dāng)中。
特定比重: 1.0
貯存: 低溫保存:2-8°C,請(qǐng)勿冷凍。
敏感性: 對(duì)光敏感
備注: 此底物對(duì)光非常敏感,應(yīng)避免陽(yáng)光直射或紫外線照射。
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