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		二氧環(huán)乙烷基片結(jié)合堿性磷酸酶標(biāo)簽的檢測方法

　　核酸檢測與1,2 - 二氧環(huán)乙烷基片結(jié)合堿性磷酸酶標(biāo)簽的檢測方法被廣泛用于核酸雜交分析。更高的吞吐量和自動化系統(tǒng)集成的需求，帶動第一微孔板現(xiàn)在主要芯片格式的核酸檢測方法的發(fā)展。無論是在溶液和固體支持捕獲/雜交分析可以被執(zhí)行。膜為基礎(chǔ)的檢測中已經(jīng)觀察到的1,2 - 二氧環(huán)乙烷檢測系統(tǒng)的好處，也能夠?qū)崿F(xiàn)在微孔板檢測。這些包括高靈敏度和動態(tài)范圍大于比色法和放射性標(biāo)記檢測系統(tǒng)。

　　幾個(gè)商業(yè)產(chǎn)品，采用1,2 -二氧環(huán)乙烷檢測系統(tǒng)可用于檢測病毒的臨床目標(biāo)。的支鏈DNA（BDNA）測定技術(shù)，最初是由Chiron公司（加利福尼亞州Emeryville），使用一個(gè)信號放大系統(tǒng)，它包括一個(gè)將多個(gè)AP標(biāo)簽附加到目標(biāo)核酸的的BDNA探頭系統(tǒng)，隨著LUMI-磷530和LUMI磷加基板。這項(xiàng)技術(shù)商業(yè)化，乙型和丙型肝炎和人類免疫缺陷病毒（HBV，HCV，HIV-1）和信使RNA定量檢測系統(tǒng)在診斷的患者的病毒載量檢測。HBV定量使用BDNA的檢測已經(jīng)證明11。

　　雜交捕獲檢測技術(shù)（Digene公司公司;馬里蘭州Silver Spring）采用信號放大系統(tǒng)，包含一個(gè)anti-RNA/DNA混合抗體，AP共軛和CDP明星的基板。雜交捕獲系統(tǒng)已經(jīng)證明，單純皰疹病毒，人類乳頭狀瘤病毒的非常靈敏的檢測。12,13同時(shí)與BDNA的系統(tǒng)和混合系統(tǒng)，信號放大和1,2 -二氧環(huán)乙烷的化學(xué)發(fā)光的組合使檢測少于一千病毒的目標(biāo)，而不核酸的擴(kuò)增。

　　與微孔板的格式與1,2 -二氧環(huán)乙烷的AP底物的幾種檢測方法，包括聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴(kuò)增，定量PCR，探針結(jié)扎，鏈置換擴(kuò)增，連接酶鏈反應(yīng)檢測病毒和其他致病序列已被執(zhí)行5化學(xué)發(fā)光檢測已經(jīng)完成準(zhǔn)備組織和培養(yǎng)細(xì)胞中的病毒基因組原位雜交與1,2 -二氧環(huán)乙烷和數(shù)字顯微圖像分析。

　　1,2 - 二氧雜環(huán)丁烷技術(shù)進(jìn)展AMPPD，CSPD，，CDP CDP明星的，和ADP明星的1,2 -二氧雜環(huán)丁烷基板AP都是基于類似的衍生苯基取代。金剛烷基的穩(wěn)定化取代基的苯基上的氯基團(tuán)的添加和定位有助于提高信號強(qiáng)度，發(fā)光動力學(xué)，量子產(chǎn)率，和pH值的要求。CSPD產(chǎn)生的信號是AMPPD獲得更加激烈，圖像分辨率優(yōu)于14，在家庭中的所有基材，CDP-Star提供最高強(qiáng)度的化學(xué)發(fā)光排放解決方案和膜為基礎(chǔ)的應(yīng)用程序和最快速的發(fā)射動力學(xué)膜為基礎(chǔ)的應(yīng)用。它非常適合快速膠片曝光和成像相機(jī)弱光敏感15 CDP產(chǎn)生半衰期最長的信號。15,16

　　Tropixβ-半乳糖苷酶底物，包括Galacton Galacton-Plus和Galacton明星，家庭各相關(guān)對口的AP基板系列。的β-半乳糖苷酶底物的酶的脫保護(hù)后，所得到的陰離子分解具有完全相同的光譜和動力學(xué)性能相關(guān)的AP的基板所顯示的。其他基板的β-葡萄糖苷酶的定量開發(fā)包括Glucuron基板17的β-葡萄糖醛酸酶和β-葡萄糖苷酶Glucon基板。

　　已開發(fā)的唾液酸衍生物的1,2 -二氧環(huán)乙烷流行性感冒病毒神經(jīng)氨酸酶（NA）為底物，基于化學(xué)發(fā)光的測定臨床分離株NA函數(shù)18，將基板提供67倍的檢測靈敏度，熒光試劑2'-O-（4 -甲基）-N-乙酰神經(jīng)氨酸（MUN）檢測閾值低至下午3點(diǎn)。其高水平的靈敏度啟用NA活性被檢測到10的12株臨床分離NA活性檢測不到熒光檢測，從扎那米韋抗病毒藥劑的臨床研究報(bào)告。此外，化學(xué)發(fā)光法，分布在四個(gè)數(shù)量級的動態(tài)范圍增加較MUN襯底實(shí)現(xiàn)與兩個(gè)數(shù)量級。NA功能的測量是最可靠和可預(yù)測的方式來監(jiān)控NA抑制劑在體內(nèi)的易感性。

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