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| | 夾心酶聯(lián)免疫吸附性能具體酶聯(lián)免疫吸附 | |
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確定方向，納米抗體的夾心法檢測(cè)的靈敏度和信號(hào)范圍上的影響，HyperBind板使用模型夾心法相比，商業(yè)板塊。在下面的例子中，HyperBind黑色NA板相比，商業(yè)的黑色的Reacti綁定NA板皮爾斯化工使用熒光夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)鼠IgG。
在初步的實(shí)驗(yàn)中，穿孔板實(shí)現(xiàn)了最高水平的直接結(jié)合的生物素化的抗體的濃度為5μg/ mL的涂覆。該HyperBindplateís最佳的直接結(jié)合濃度為0.5微克/毫升，或10倍小于穿孔板。
因此，將生物素化的羊抗鼠抗體涂覆在每塊板在其最佳濃度：5μg/ mL的，皮爾斯板和0.5μg/ mL的HyperBind。PBS/0.1％BSA中，向每孔加入100微升小鼠IgG的濃度的增加，孵育一小時(shí)的所有樣品在室溫下在振蕩器上，然后通過(guò)洗滌步驟的測(cè)定法進(jìn)行。的山羊抗小鼠辣根過(guò)氧化物酶（GAM-HRP）檢測(cè)試劑加入每個(gè)孔中并孵育半小時(shí)。洗滌后，皮爾斯化學(xué)QuantaBlu底物試劑加入到所有孔中，一小時(shí)后，在325 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為420 nm的激發(fā)波長(zhǎng)和熒光測(cè)定。
鼠IgG抗體夾心ELISA使用HyperBind和皮爾斯Neutravidin的板（NA）。黑色HyperBind板被涂在0.5微克/毫升捕捉AB和皮爾斯黑盤在5.0微克/毫升。HyperBind板產(chǎn)生更高的信號(hào)靈敏度，同時(shí)使用其他商業(yè)板塊所需要的抗體只有10％（點(diǎn)擊圖片放大）。即使在其最佳的涂布濃度，皮爾斯不適用板產(chǎn)生較低的信號(hào)和靈敏度比與HyperBind板（參見圖4）。較高的直接結(jié)合效率HyperBind板可能會(huì)導(dǎo)致在檢測(cè)與傳統(tǒng)的板相比，具有更高的靈敏度和信號(hào)的動(dòng)態(tài)范圍增加。
具體酶聯(lián)免疫吸附一些各種生理指標(biāo)的ELISA試劑盒已開發(fā)使用HyperBind SA-涂層板。例如，促甲狀腺激素（TSH）的ELISA檢測(cè)法的使用生物素化的捕獲抗體涂覆在HyperBind和四個(gè)商業(yè)SA板。用于所有的板相同的抗TSH檢測(cè)抗體-HRP共軛物和相同的溫育時(shí)間。檢測(cè)SA HyperBind板開發(fā)最佳的信號(hào)范圍和靈敏度在所有五個(gè)分析HyperBind鋼板也被成功地用于在核酸檢測(cè)中的檢測(cè)。
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