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		電化學用于凝血酶檢測23在這些配置中

　　許多不同的在電化學aptasensors已用于凝血酶檢測23在這些配置中，凝血酶檢測到使用的夾層格式。夾心法格式是僅適用于具有多個適配體結(jié)合區(qū)域的情況下的目標。凝血酶有兩個的正電性exosites，這兩者都能夠結(jié)合特定的適配體。

　　夾心法進行固定金電極上的自組裝單層硫醇化的適體。隨后孵育電極與凝血酶。在第二次溫育步驟，辣根過氧化物酶（HRP）標記的適配體被允許綁定到其他的凝血酶外部位。HRP標記的適配體，制備生物素標記的適配體與鏈霉親和素-HRP孵育，有效地形成的過氧化物酶標記的適配體。的HRP，從而固定在電極表面上，使用過氧化氫 ??和擴散，鋨的基于介體（輸出端（聯(lián)吡啶）2（吡咯-CH 2 -NH 2）] Cl）的電化學測定。在電極上測得的電流相關(guān)的凝血酶通過校準的數(shù)量（參見圖3）。

　　適體的凝血酶適體相互作用的優(yōu)化配置產(chǎn)生的電流為4.5μA。陰性對照驗證該信號不是由于非特異性吸附。陰性對照，無凝血酶固定在電極表面上，導(dǎo)致在電流為1.8μA。第二個陰性對照，無底座的適體，產(chǎn)生一個相同的電流。第三個陰性對照，未經(jīng)HRP標記的適配體，導(dǎo)致0.2μA的電流（參見圖4）。

　　報道的電化學響應(yīng)電流差在-0.1 V（對銀和氯化銀）之前和之后加入6 mM的過氧化氫和鋨的氧化還原介體。擔任過氧化氫的HRP的底物的標簽，以及允許鋨氧化還原介體的酶的轉(zhuǎn)導(dǎo)成可測量的電流響應(yīng)的營業(yè)額。

　　雖然這個實驗中遭受顯著的非特異性吸附的HRP標記的適配體，該系統(tǒng)的檢測極限為92納米（參見圖5）。檢出限為測量通過沿著線性回歸直線的線性響應(yīng)的的電流抗凝血酶值擬合。線的標準偏差的測定和乘以3的假沒有檢測的概率降低至5％。添加該值的信號的值是區(qū)別于噪聲響應(yīng)。

　　其結(jié)果是過氧化物酶標簽，電化學檢測顯示出顯著的背景響應(yīng)（參見圖4和圖5）。過氧化物酶標簽表現(xiàn)出強烈的非特異性吸附的電化學傳感器。其他的電化學親和傳感器，使用過氧化物酶已觀察到這種效應(yīng)。過氧化物酶的電化學檢測是非常敏感的，并沒有得到充分的必要條件，以防止在過氧化物酶結(jié)合到電極表面。

　　結(jié)論牢固結(jié)合和具體的目標以外的明顯的互補序列的寡核苷酸序列的能力允許基于寡核苷酸的檢測策略將用于在新的領(lǐng)域，如治療學，分離技術(shù)和生物傳感器。適體的檢測策略中的應(yīng)用是特別有前途的。

　　適體提供有效身份證件和生產(chǎn)方法（例如，SELEX）??，簡單的化學合成（例如，自動合成直接分析支持），固定在高密度，檢測所有毒素的可能性，并在非生理條件下的穩(wěn)定性。事實上，適體可能取代在生物傳感器應(yīng)用中??的抗體。然而，首先需要匹配的抗體庫，適體生物傳感器。其次，許多現(xiàn)成的開發(fā)，優(yōu)化和解決這些實驗的方法將需要創(chuàng)建適配子之前將很容易通過。

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