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改進(jìn)的敏感性和特異性抗原表位的識(shí)別和增強(qiáng) | |||
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鼠標(biāo)單克隆抗體已經(jīng)主導(dǎo)工具在研究和診斷和治療領(lǐng)域。 然而,一項(xiàng)新技術(shù),以生成兔單克隆抗體提供了一種改進(jìn)的替代為科學(xué)界和新穎的診斷和治療的機(jī)會(huì)。 這種新技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是多方面的:高親和力,提高特異性、識(shí)別抗原和抗原,是nonimmunogenic到嚙齒動(dòng)物。 而免疫分析法是最受歡迎的分析技術(shù)應(yīng)用于臨床和臨床前診斷,仍有差距的開發(fā)商和制造商抗體試管。 這是因?yàn)?在一定程度上,缺乏高質(zhì)量的抗體在免疫測(cè)定和增加的需求為更好或小說抗體隨著基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)的出現(xiàn),epitomics。 抗體性能相關(guān)的敏感性,特異性,線性動(dòng)態(tài)范圍、基體效應(yīng)、免疫測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)化集的基本決定因素的質(zhì)量試管醫(yī)療設(shè)備。 本文討論的一些特點(diǎn)兔免疫系統(tǒng),導(dǎo)致更好的抗體生成、評(píng)論兔單克隆抗體技術(shù),并將其應(yīng)用在診斷領(lǐng)域和潛力。
一個(gè)更好的免疫系統(tǒng)
雖然兔子是眾所周知的,安裝一個(gè)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)對(duì)外國(guó)抗原和兔多克隆抗體是最古老和最廣泛使用的研究工具在免疫學(xué),為什么兔子一般產(chǎn)生更好的抗體抗原許多比嚙齒動(dòng)物仍未被完全弄清楚。 最近的研究進(jìn)展在兔免疫學(xué)有進(jìn)一步了解這個(gè)問題:在初級(jí)和隨后的免疫接種,天真的B細(xì)胞分化成刺激抗體分泌等離子或記憶細(xì)胞。 t細(xì)胞抗原MHC類提供的我和II類分子通常肽,而模CD1分子MHC分子,家庭,現(xiàn)在的nonpeptidic抗原如脂質(zhì)或糖脂。 CD1分子的家庭可分為三組:第1組(CD1a,CD1b,CD1c);第二組(CD1d);和組3(CD1e)。 有趣的是,兔子表達(dá)所有三組,而老鼠只有表達(dá)組2,但不是組1和3。 組1分子主要是提供一個(gè)廣泛的脂類抗原T細(xì)胞無性繁殖系地多元化調(diào)解適應(yīng)性免疫。 相比之下,組2的分子脂類抗原自然殺手T(NKT細(xì)胞)。 1 因此,區(qū)別中陳述的兔子和老鼠之間nonpeptidic抗原可能解釋為什么兔子做出更好的抗體或糖脂脂質(zhì)比老鼠一般。
初級(jí)和二級(jí)抗體劇目的發(fā)展具有獨(dú)特的特征。兔子幾 2 ,這也可能占的質(zhì)量產(chǎn)生抗體。 首先,與人類和老鼠,兔子B細(xì)胞在淋巴組織發(fā)育會(huì)內(nèi)臟相關(guān)(高爾特),包括附錄。 這就是B細(xì)胞囊形式和廣泛的B細(xì)胞擴(kuò)張發(fā)生在腸道微生物區(qū)系的反應(yīng)nonimmunogen-specific抗體曲目放大,導(dǎo)致
一個(gè)更大的天真的抗體庫(kù)。 主要的高拷貝數(shù)曲目是由體細(xì)胞多樣化的搞笑基因主要是通過基因轉(zhuǎn)換,以及在較小程度上的體細(xì)胞高突變率也不能激活)。 基因轉(zhuǎn)換一個(gè)獨(dú)特的免疫球蛋白g基因多樣化的機(jī)制涉及集群兔子是一個(gè)過程從上游基因的核苷酸變化的多樣性,增強(qiáng)抗體曲目。
第二,B細(xì)胞在兔子高爾特選擇通過正面和負(fù)面的選擇性事件。 細(xì)胞的生存選擇過程出口外圍參與進(jìn)一步參與外國(guó)抗原。 兩個(gè)基因轉(zhuǎn)換和體高突變率也不能激活)發(fā)生在次級(jí)淋巴組織如脾臟、淋巴結(jié)和集合淋巴結(jié)的補(bǔ)丁二級(jí)抗體親和力成熟分化、曲目。 事實(shí)上,功能的B細(xì)胞濾泡擴(kuò)張高爾特和基因轉(zhuǎn)換機(jī)制多樣化提供更大的兔子曲目抗體抗體選擇。
第三,兔抗體有點(diǎn)簡(jiǎn)單的比老鼠和人類抗體。 兔體內(nèi)沒有子類,因?yàn)樗挥幸粋€(gè)Cγ基因,和絕大多數(shù)(90 95%)的光鏈來自Cκ1同形像。 只有5%到10%的總免疫球蛋白輕鏈?zhǔn)峭蜗駆。這些特征的兔子體內(nèi)使基因克隆容易得多,比用鼠標(biāo)或人類免疫球蛋白g。 兔體內(nèi)有額外的二硫債券的重鏈可變區(qū);一個(gè)額外的二硫鍵和CκVκ之間也存在在常用b4和b5異型兔子。 這些額外的二硫債券可能導(dǎo)致偉大的穩(wěn)定和長(zhǎng)保質(zhì)期的兔抗體(圖1),它是指出,兔子immunodominance和少顯示更少發(fā)生當(dāng)聚合物與重復(fù)IgM域如脂類和碳水化合物是immunogens進(jìn)行免疫接種。 雖然兔子免疫系統(tǒng)通常設(shè)置的基礎(chǔ)更好的抗體選擇,為了發(fā)展最合適的抗體為某個(gè)特定的應(yīng)用程序也必須要考慮到質(zhì)量、結(jié)構(gòu)和免疫原格式;結(jié)合的免疫原和運(yùn)營(yíng)商,如果必要的;免疫方案;抗體篩查,篩查策略分析。
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