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購(gòu)買時(shí)請(qǐng)注意選擇相應(yīng)的產(chǎn)品名稱

		酶底物是由一個(gè)酶催化生成一個(gè)或更多的產(chǎn)品

　　一般過(guò)程為橫向流酶化驗(yàn)是描繪在圖1該方法結(jié)合了酶反應(yīng)與LFIA。這個(gè)反應(yīng)可能裂開(kāi)一個(gè)化學(xué)鍵,形成一個(gè)新的債券,或?qū)е聵?gòu)象異構(gòu)化。如果測(cè)試的目的是屏幕的酶的抑制劑,抑制劑也將出現(xiàn)在樣品。側(cè)流試驗(yàn)片的后面可以使用酶反應(yīng)完成后,或酶反應(yīng)可以被集成到側(cè)流試驗(yàn)片,這將需要一個(gè)特定的機(jī)制來(lái)控制反應(yīng)時(shí)間和條件。例如,一個(gè)側(cè)流試驗(yàn)片可能會(huì)加上一個(gè)微流控裝置來(lái)控制反應(yīng)時(shí)間和條件。

　　從理論上講,可以構(gòu)造LFIA檢測(cè)基質(zhì)的消失,外觀的產(chǎn)品,或兩者同時(shí),提供抗體是可用的。然而,這些抗體可能不存在,尤其是對(duì)小分子底物如短肽。在這些情況下,它是可取的標(biāo)記底物與特定的綁定和/或探針。根據(jù)底物和酶,不同分析格式可以構(gòu)造。

　　描述了一個(gè)分析格式,使用磁粉,一個(gè)襯底,和一個(gè)特定的綁定我(B1)檢測(cè)一種酶,包括債券解理發(fā)布一個(gè)產(chǎn)品。一種酶底物是共價(jià)連接到一個(gè)磁性粒子和B1形成磁粒子基于襯底共軛。當(dāng)一個(gè)酶劈開(kāi)了襯底共軛釋放B1從磁粉,自由B1可以分開(kāi)兩個(gè)消化和完整的襯底軛合物通過(guò)磁場(chǎng),檢測(cè)到一個(gè)側(cè)流試驗(yàn)片來(lái)證明這個(gè)原理,從SG metalloprotease被用作模型系統(tǒng)。 β-casein是個(gè)好襯底為metalloprotease。生物素酪蛋白議員準(zhǔn)備作為酶底物。

　　β-casein的酰胺債券上的生物素酪蛋白議員是由蛋白酶裂解釋放一些或所有的生物素根從議員。下院議員都被一個(gè)磁鐵,和生物素分子在溶液可以發(fā)現(xiàn)I型橫向流測(cè)試帶。側(cè)流試驗(yàn)片的檢測(cè)生物素可以普遍用于分析各種酶只要酶反應(yīng)釋放生物素從襯底共軛。

　　圖3顯示了結(jié)果metalloprotease在一系列的檢測(cè)樣品中摻入不同量的metalloprotease。沒(méi)有活躍的蛋白酶,所有生物素分子附在議員和被從解決方案通過(guò)一個(gè)磁鐵,因此沒(méi)有生物素仍然在解決方案。當(dāng)解決方案應(yīng)用到類型我側(cè)流試驗(yàn)片,所有的sa bp粒子釋放被俘的共軛墊在捕獲區(qū)我的固定化生物素bsa展示強(qiáng)大的藍(lán)線(200?g停用)。捕獲區(qū)二顯示幾乎沒(méi)有藍(lán)色的信號(hào)。

　　在0.02 - -0.2?g的存在活躍的蛋白酶,一些生物素分子被釋放從議員。生物素分子發(fā)布的競(jìng)爭(zhēng),從而減少了sa bp股價(jià)bp能夠被生物素bsa在捕獲帶我,導(dǎo)致一個(gè)較弱的信號(hào)。 sa bps飽和與釋放生物素分子通過(guò)捕捉帶我和綁定到多熔素在捕獲區(qū)II產(chǎn)生一個(gè)強(qiáng)烈的信號(hào)。帶正電的多熔素在捕獲區(qū)II可以捕獲任何粒子與一個(gè)負(fù)電荷。因此,顏色密度降低的捕獲帶我酶活性增加,而顏色密度區(qū)二增加捕獲。當(dāng)數(shù)量的蛋白酶是一個(gè)或四?g,所有的生物素分子被釋放從襯底配合到解決方案。在這種情況下,捕獲區(qū)我沒(méi)有顯示藍(lán)色的線,而捕獲區(qū)二世形成了強(qiáng)烈的藍(lán)色線。

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