購(gòu)買(mǎi)時(shí)請(qǐng)注意選擇相應(yīng)的產(chǎn)品名稱(chēng)
檢測(cè)蛋白酶的側(cè)流試驗(yàn)使用彩色粒子酶 | |||
---|---|---|---|
      
一個(gè)橫向流酶分析格式,它使用非議員如顏色或熒光粒子。 一種酶底物是共價(jià)標(biāo)記與一個(gè)特定的綁定我(B1)和一個(gè)彩色粒子使一個(gè)襯底共軛。 沒(méi)有一種酶,粒子被第二粘合劑(B2,B1特有的),是在捕獲帶我上固定一個(gè)II型橫向流裝置來(lái)顯示一個(gè)強(qiáng)烈顏色信號(hào)。 捕獲區(qū)二世應(yīng)該顯示要么沒(méi)有信號(hào)或弱信號(hào)捕獲能力是否捕獲區(qū)我的襯底共軛是超過(guò)總額的襯底共軛。
在存在一種酶,劈開(kāi)了襯底,一些或所有的B1將釋放的粒子。 發(fā)布的B1可以流的速度比基質(zhì)配合來(lái)綁定與B2在捕獲區(qū)I .此外,消化或部分消化底物軛合物將會(huì)有更少的B1根;因此,他們將有更少的或沒(méi)有可能被捕獲的B2在捕獲區(qū)我產(chǎn)生一個(gè)較弱的信號(hào)或無(wú)信號(hào)。 的消化或部分消化底物軛合物通過(guò)捕捉帶我而被多熔素在捕獲區(qū)二世來(lái)顯示一個(gè)強(qiáng)烈的信號(hào)。
演示的原理分析格式在圖4中,生物素酪蛋白bp準(zhǔn)備作為襯底共軛對(duì)SG metalloprotease從。 圖5顯示了開(kāi)發(fā)測(cè)試帶分析樣品中摻入metalloprotease的0至40攝食ng。 在缺乏metalloprotease,襯底軛合物捕獲在捕獲區(qū)我的類(lèi)型我條來(lái)顯示一個(gè)強(qiáng)烈的信號(hào)。 捕獲區(qū)二顯示沒(méi)有信號(hào),因?yàn)樗械囊r底軛合物被捕獲在捕獲帶我。
在存在0.5 -40 ng的metalloprotease,酶消化底物軛合物釋放一些生物素分子,以便襯底軛合物有少或無(wú)生物素根。 生物素分子的釋放和生物素根仍然附著在基片配合參加抗生物素抗體在捕獲帶我來(lái)產(chǎn)生一個(gè)弱的藍(lán)色信號(hào),而一些消化或部分消化底物軛合物通過(guò)捕捉帶我和被束縛在捕獲區(qū)II產(chǎn)生一個(gè)更強(qiáng)的藍(lán)色信號(hào)。
當(dāng)使用metalloprotease 40 ng的,所有的生物素根被釋放從襯底軛合物,沒(méi)有更多的生物素是附加到藍(lán)色粒子。 顏色的強(qiáng)度在捕獲區(qū)我的身體非常虛弱,和藍(lán)色的顏色強(qiáng)度在捕獲區(qū)二世是強(qiáng)大的。 一般來(lái)說(shuō),顏色強(qiáng)度的降低,捕獲區(qū)我的顏色強(qiáng)度的捕獲區(qū)二增加的數(shù)量在增加。樣品的蛋白酶
圖6。 劑量反應(yīng)曲線(xiàn)metalloprotease檢測(cè)(Y軸:比例反射率,I2 /(I1 + I2))。
顏色強(qiáng)度捕獲區(qū)I和II可以提供半定量或定量測(cè)量量的甚至活性酶。 反射強(qiáng)度的同時(shí)捕獲區(qū)I和II測(cè)量使用一個(gè)內(nèi)部開(kāi)發(fā)的掃描儀。 圖6顯示了反射率的捕獲區(qū)二世(I2)捕獲區(qū)域的總和I和II(I1 + I2)作為一個(gè)函數(shù)的數(shù)量在一個(gè)示例。metalloprotease 劑量反應(yīng)曲線(xiàn)顯示了良好的線(xiàn)性相關(guān)關(guān)系強(qiáng)度和量的反射率蛋白酶前飽和。
結(jié)論
本文演示了改編的側(cè)流格式檢測(cè)活躍的酶。 橫向流酶測(cè)定技術(shù)保留的所有好處LFIA如簡(jiǎn)單,用戶(hù)使用方便,成本低。 盡管當(dāng)前的研究集中在檢測(cè)酶涉及債券劈理,分析技術(shù)可以適用于酶參與債券形成和構(gòu)象異構(gòu)化。 除了檢測(cè)酶,測(cè)定技術(shù)也應(yīng)該用于檢測(cè)任何分子物種參與酶反應(yīng),如酶抑制劑。 這些技術(shù)應(yīng)該找到各種現(xiàn)實(shí)世界的應(yīng)用,如POC和場(chǎng)外測(cè)試陰道酵母菌感染(使用spartyl蛋白酶作為生物標(biāo)志物)和慢性傷口(使用蛋白酶從細(xì)菌病原體作為生物標(biāo)記)。
引用
1。 G Posthuma-Trumpie,J Korf,和一個(gè)Amerongen,“雙金納米粒子共軛基礎(chǔ)側(cè)流試驗(yàn)(LFA)方法分析肌鈣蛋白I、“分析、生物分析化學(xué)393(2009):569 - 582。
2。 D布魯克斯,et al。,“快速、定量全血檢測(cè)試紙快速檢測(cè)平臺(tái)”,臨床化學(xué),45(1999):1676 - 1678。
3。 RG大梁,“定量檢測(cè)分析物檢測(cè)試紙條上,“美國(guó)專(zhuān)利5569608(1996)。
4。 H郭和拉Meritt,”法測(cè)定分析物濃度在側(cè)流免疫表現(xiàn)出高劑量的三明治鉤效應(yīng)”,美國(guó)專(zhuān)利6183972 b1。
5。 CR桑頓,交流Groenhof,R福勒斯特,“一步法,檢測(cè)試紙的側(cè)流裝置特定于Rhizoctoniasolani和某些相關(guān)的物種,其用于檢測(cè)和量化R .龍葵在土壤中,“植物病理學(xué)94(2004):280。
6。 萊托蘭伯特和是費(fèi)舍爾,“診斷化驗(yàn)包括多路復(fù)用側(cè)流免疫測(cè)定量子點(diǎn),”美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)20050250141 a1(2005)。
7。 X的歌,“橫向流化驗(yàn)使用時(shí)間分辨發(fā)光,“試管技術(shù)15,沒(méi)有。 4(2009):31 37。
8。 X的歌,“膜側(cè)流試驗(yàn)裝置,利用磷光檢測(cè),”美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)20050112703 a1(2005)。
9。 C Feistel”,系統(tǒng)和方法來(lái)執(zhí)行磁色譜分析,“美國(guó)專(zhuān)利6136549(2000)。
10。 哈伯勒爾,et al。,”拉曼主動(dòng)側(cè)流裝置和檢測(cè)方法,”美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)20070059203(2007)。
11。 P Corstjens,et al。”,使用升頻轉(zhuǎn)換熒光粉記者在橫向流分析來(lái)檢測(cè)特定核酸序列:一種快速、敏感的DNA測(cè)試,以確定感染人類(lèi)乳頭瘤病毒16型”,臨床化學(xué)47(2001):1885 - 1893。
12。 X毛澤東,et al。,“一次性核酸生物傳感器基于金納米探針和側(cè)流帶,“分析化學(xué)81(2009):1660 - 1668。
13。 Y總裁et al。,“發(fā)展寡核苷酸側(cè)流免疫分析法對(duì)多參數(shù)檢測(cè)、《免疫學(xué)方法258(2001):73 - 84。
14。 j . Naglik,et al。,“白色念珠菌分泌天門(mén)冬氨酰Proteinases在毒力和致病,“微生物學(xué)154(2008)3266 - 3280。
15。 J Naglik,S和B Challacombe,Hube”,Proteinases Sap1 Sap2分泌天門(mén)冬氨酰,造成組織傷害一個(gè)體外模型的陰道Candidias基于重組人類(lèi)陰道上皮,“微生物學(xué)和分子生物學(xué)評(píng)論》67(2003):400 - 428。
|
上一篇:酶底物是由一個(gè)酶催化生成一個(gè)或更多的產(chǎn)品 | 下一篇:造父變星掙誰(shuí)支持結(jié)核快速測(cè)試 |
---|
無(wú)法在這個(gè)位置找到: xy/left.htm
首 頁(yè) |
中檢所對(duì)照品|
中檢所標(biāo)準(zhǔn)品|
化學(xué)對(duì)照品|
中藥對(duì)照品|
雜質(zhì)對(duì)照品|
對(duì)照品購(gòu)買(mǎi)|
新聞中心|
聯(lián)系我們|
網(wǎng)站地圖
2013-2019@ 河南尋夢(mèng)電子商務(wù)有限公司版權(quán)所有
豫ICP備17046142號(hào)-2