購買時請注意選擇相應的產(chǎn)品名稱
| 關(guān)鍵的評估對于充足率各種細胞表達系統(tǒng)今天仍 | |||
|---|---|---|---|
|
除了常規(guī)細胞表達系統(tǒng)之前使用,今天的技術(shù)提供有趣的選擇通過瞬態(tài)哺乳動物細胞系統(tǒng),能產(chǎn)生顯著的更高的收益。 12 然而,這樣的系統(tǒng)不受限制的適用性對于臨床診斷應該被認真評估。 廣泛的知識和經(jīng)驗獲得了在過去的十年里已經(jīng)導致了下面的結(jié)論就明智的和面向目標的應用在常規(guī)的重組autoantigens商業(yè)臨床診斷可靠性。 Biotechnologically產(chǎn)生自身抗原目標提供可靠的替代本地抗原,有時甚至超過本國同行(即。 ,TPO),基于觀測的越來越多的測試套件,使用它們。
獨特性。 幾個經(jīng)常應用autoantigens只能產(chǎn)生recombinantly(如。 ,著絲粒蛋白B和A)。由于無法逾越的困難從自然資源中提取其他autoantigens,他們主要是甚至完全商業(yè)化作為重組蛋白(如。 、丙氨酰/ threonyl-tRNA synthetases(pl 12、pl 7],formiminotransferase cyclodeaminase(LC1],細胞色素P450 2 d6[LKM1],Ro / ss一個[52負責]蛋白質(zhì))。
很多很多的大型批量再現(xiàn)性。 高質(zhì)量的重組自身抗原產(chǎn)品貢獻有助于開發(fā)的細試管產(chǎn)品。 一個有價值的特性與復雜的重組抗原表達和純化生產(chǎn)系統(tǒng)是大型批量一致性高很多很多(見圖 1 和 2 )。
蛋白質(zhì)的表達在桿狀病毒感染昆蟲細胞和純化到至少90%的同質(zhì)性。 抗原是點綴在硝化纖維帶和孵化與主要血清和二級美聯(lián)社抗體軛合物,其次通過開發(fā)和NBT / BCIP。 數(shù)據(jù)由r . l . Humbel教授,盧森堡。分析復雜的抗原。 一些自身抗原目標可以在性質(zhì)和組成復雜不同的單一多肽。 為了區(qū)分血清學亞種、離散和理想情況下重組抗原目標域應檢查。 圖3 顯示結(jié)果的分析基于個體重組抗原抗體U1-snRNP(68/70負責,和C多肽),線粒體M2抗原(完整的和個人的,BCOADC-E2多肽,OGDC-E2 pdc e2),核糖體組織磷酸化蛋白奠定基礎(chǔ)(P0,P1,P2)。
的意義越來越重要的生物技術(shù)自身抗原的目標變得更加清晰當10年記錄的臨床相關(guān)的診斷抗原是與最近的一個概述autoantigens重組(見 表II )。 11 此表只列出了那些autoantigens是商用關(guān)鍵組件,因為他們滿足下列要求:
非常高純度(95%以上),可以通過六組氨酸融合蛋白。 這種高純度使隨后的溫柔和高效固定化金屬親和層析純化(見圖 4 和 5 )。 13
證實了免疫/抗原功能。
高穩(wěn)定性,它允許存儲至少5年沒有喪失免疫活動(見圖 6 和 7 )。
足夠高的收益率產(chǎn)生很多大小多達數(shù)幾百毫克。
建立標準的生產(chǎn)流程。
沒有疑問的適用性在所有試管試驗技術(shù),目前可用的(如。 、ELISA、線測定,immunodot,珠的基礎(chǔ)技術(shù),如磁或熒光染料標記的多路傳輸系統(tǒng)、蛋白質(zhì)生物芯片/微陣列)。
凈化的LC1。 桿狀病毒感染昆蟲細胞溶解產(chǎn)物(CL)是應用于鎳加載螯合瓊脂糖柱,水洗(W),并與緩沖區(qū)的eluted咪唑濃度的增加(Fr。1 Fr。 5)。標記是表示。 純LC1 elutes作為64 -負責蛋白質(zhì)純度> 95%的有(Fr。4)。
因為多路復用系統(tǒng)和蛋白質(zhì)生物芯片/微陣列是相對較新的和高度創(chuàng)新,他們值得進一步討論其發(fā)展的當前狀態(tài)。 因為穩(wěn)步增長和新興技術(shù)的可用性multianalyte的質(zhì)量驗證重組抗原必須不僅維持,但也增加了為了滿足每一個需求在未來應用試管。 抗原應適合化學耦合使用幾乎任何化學和能被發(fā)現(xiàn)在許多表面。
凝膠電泳和免疫印跡分析三個獨立的很多(一)著絲粒蛋白B,(B)喬1和(c)增殖細胞核抗原。 蛋白質(zhì)的分離在6 - 20%梯度凝膠和轉(zhuǎn)移到PVDF膜。 探討了膜與病人血清和發(fā)達與美聯(lián)社共軛反人類的IgG抗體NBT / BCIP緊隨其后。
大多數(shù)抗原的研究和發(fā)展Diarect管道已經(jīng)被用于開發(fā)和生產(chǎn)數(shù)組或珠式多路化驗自從他們的使用進行了探討研究,分析自身抗原陣列自身抗體。 14、15 微陣列和越來越多路復用技術(shù)將經(jīng)常珠基于基因組和蛋白質(zhì)組學的方法補充發(fā)現(xiàn)自身免疫。 最近的研究提供了一個更大的理解中,這些新技術(shù)。
|
| 上一篇：考慮各種因素試管autoantigens當選擇為他們的分析 | 下一篇：最近的自身抗原的發(fā)展檢測到潛伏在更高的溫度 |
|---|
無法在這個位置找到： xy/left.htm
2013-2019@ 河南尋夢電子商務有限公司版權(quán)所有
豫ICP備17046142號-2