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氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留常用的幾個(gè)檢測(cè)技術(shù) | |||
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氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留常用的幾個(gè)檢測(cè)技術(shù)高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定高效液相色譜法對(duì)于氣相色譜法不能分析的高沸點(diǎn)或穩(wěn)定性差的農(nóng)藥可以進(jìn)行有效的分離檢測(cè),特別適于檢測(cè)氨基甲酸酯類農(nóng)藥。大部分氨基甲酸酯類農(nóng)藥的HPLC檢測(cè)采用反相C8或C18柱,檢出限一般高于氣相色譜(GC)的檢出限。近年來多采用液相色譜法柱后衍生技術(shù),能夠使氨基甲酸酯類農(nóng)藥中的甲氨基團(tuán)在堿液作用下生成的甲胺與衍生試劑反應(yīng)生成一種強(qiáng)熒光物質(zhì),可用高靈敏度的熒光檢測(cè)器檢測(cè)該物質(zhì),選擇性高,基質(zhì)干擾小,是檢測(cè)氨基甲酸酯類農(nóng)藥最有效、最靈敏的方法之一。馬紀(jì)偉等通過柱后衍生化,熒光檢測(cè)器(熒光波長為445nm)定性定量測(cè)定獼猴桃中11種氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量。11種農(nóng)藥在30rain內(nèi)可以得到很好的分離,線性范圍為0.01 - 50.00mg/L,線性相關(guān)系數(shù)為0.9989-0.9999,檢出限為5.0- 0.7ug/L,方法回收率為82.96% - 101.10%。
免疫分析法免疫分析法(Immunoassay)是基于抗原和抗體的特異性識(shí)別和結(jié)合反應(yīng)檢測(cè)的方法。根據(jù)引入示蹤物的不同,免疫分析法可分為熒光免疫測(cè)定法(FIA)、酶免疫測(cè)定法(EIA)、放射免疫測(cè)定法(RIA)和流動(dòng)注射免疫測(cè)定法(BIA)。自1983年以來,隨著EIA的穩(wěn)定性和靈敏度不斷改善,它在農(nóng)藥分析中得以廣泛應(yīng)用,尤其是酶免疫吸附測(cè)定法(ELISA)應(yīng)用最廣泛,現(xiàn)已成為首選方法。例如采用單抗ELISA檢測(cè)奶、肉、肝中的涕滅威,谷物中的西維因等。不過免疫分析法在實(shí)際運(yùn)用中還是存在少許的問題,比如說免疫分析法的靈敏度相對(duì)于其他檢測(cè)方法還需進(jìn)一步的提高;另外在需要測(cè)定的農(nóng)藥種類多于10種以上時(shí),將難于同時(shí)檢測(cè)出來。
生物傳感器法(Biosensor)是利用具有分子識(shí)別能力的生物活性物質(zhì)做為與能量轉(zhuǎn)換器緊密配合的緊密部件,能夠?qū)μ囟ǚN類的化學(xué)物質(zhì)或生物活性物質(zhì)進(jìn)行選擇性和可逆響應(yīng)的分析裝置。Pogacnik等用乙酰膽堿酯酶和丁酰膽堿酯酶作為敏感材料,做成了光熱生物傳感器,對(duì)蔬菜中的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥進(jìn)行測(cè)定,其結(jié)果與GC-MS檢測(cè)結(jié)果一致。Nogue用一種固化了醛脫氫酶的酶?jìng)鞲衅鳈z測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯農(nóng)藥,其最小檢出量為9ng/kg,而傳統(tǒng)方法的最小檢出量為400ng/kg。
氣相色譜法(GC)測(cè)定氣相色譜法(GC)是一種經(jīng)典的農(nóng)殘檢測(cè)方法,約70%的農(nóng)藥殘留都是用氣相色譜法來檢測(cè)。氨基甲酸酯類農(nóng)藥在高溫中不穩(wěn)定,即使在選擇柱條件方面下很大功夫,仍不可避免產(chǎn)生氨基甲酸酯的分解,同時(shí)也缺乏靈敏度高的選擇性檢測(cè)器,于是只能對(duì)不發(fā)生分解的氨基甲酸酯進(jìn)行直接GC測(cè)定。而對(duì)于易熱分解的化合物,或是考慮將氨基甲酸酯完全水解,以測(cè)定氨基甲酸酯的甲胺或酚部分,或是通過熱穩(wěn)定衍生化后測(cè)定其衍生物。陳霞等建立了蔬菜中24種有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測(cè)新方法,在蔬菜中3個(gè)濃度添加水平的平均回收率為70.1% - 113.4%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)l.8%~12.4%,該方法準(zhǔn)確,雜質(zhì)干擾少,操作簡(jiǎn)便,適用于蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留的檢測(cè)。
酶抑制法酶抑制法(Enzyme Inhibition)在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)中應(yīng)用比較普遍。其檢測(cè)原理是利用氨基甲酸酯農(nóng)藥對(duì)動(dòng)物組織或血液中的膽堿酯酶的強(qiáng)抑制作用,通過其水解產(chǎn)物與顯色劑產(chǎn)生的顏色反應(yīng)來計(jì)算抑制率,從而判斷出樣品中高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯農(nóng)藥的存在。李昕等采用酶抑制顯色方法,應(yīng)用自制的乙酰膽堿酯酶制成農(nóng)藥快速檢測(cè)試劑盒檢測(cè)果蔬中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥,檢測(cè)靈敏度在0.001~0.lmg/kg范圍。酶抑制法農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)快速、簡(jiǎn)便、成本低、不需大型設(shè)備,在衛(wèi)生檢疫和環(huán)境監(jiān)測(cè)方面有廣泛的使用價(jià)值。酶抑制法對(duì)常見農(nóng)藥的檢出限通常都高于所對(duì)應(yīng)農(nóng)藥的最大殘留限量,適合做初步定性篩選。
液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS/HPLC-MS/MS) 液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)是以噴霧離子源和大氣壓化學(xué)電離源等接口技術(shù)將液相色譜和質(zhì)譜串聯(lián)起來作為整機(jī)使用的檢測(cè)技術(shù),在分析對(duì)熱不穩(wěn)定,相對(duì)分子質(zhì)量較大,難以用氣相色譜分析的化合物檢測(cè)應(yīng)用較為成功,具有檢測(cè)靈敏度高、選擇性好、定性定量同時(shí)進(jìn)行、結(jié)果可靠等優(yōu)點(diǎn),是一種高效率、高可靠性的分析技術(shù)。陳笑梅等采用HPLC-ESI(+)-MS/MS同時(shí)檢測(cè)糧谷中9種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量。農(nóng)藥在0.1- 100ug/L范圍內(nèi)線性良好,相關(guān)系數(shù)為0.9986-0.9998。在0.001 - O.05mg/kg濃度范圍內(nèi),平均加標(biāo)回收率在73.40% - 102.01%之間;相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.25%~9.94%。該方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏、凈化效果好。
其他色譜技術(shù)測(cè)定其它應(yīng)用于氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留分析的色譜技術(shù)還有超臨界流體色譜法(SFC)和薄層色譜(TEe)等。SFC是以超臨界流體作為色譜流動(dòng)相的分離檢測(cè)技術(shù)。SFC對(duì)氣相色譜和液相色譜的優(yōu)點(diǎn)加以綜合利用,彌補(bǔ)了GC和HPLC的不足,可以在較低溫度下分析分子量較大,對(duì)熱不穩(wěn)定、極性較強(qiáng)和不易分析的化合物。Murugaverl等用SFC- MS技術(shù)分析了涕滅威西維因等農(nóng)藥,檢測(cè)限可以達(dá)到Pg水平。TLC是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù),吳莉等利用雙波長反射吸收薄層掃描法研究了呋喃丹定量分析方法,呋喃丹的檢出限為0.3ug,回收率為96.94%~100.38%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.73%。
氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(GC-MS) 色譜法具有極強(qiáng)的分離能力,但僅以保留時(shí)間定性,因此它對(duì)未知化合物的定性能力不佳,需要另外的方法來確證。GC-MS法是近年來發(fā)展起來的大型儀器,其不僅具有氣相色譜法的高分離效能,還具有質(zhì)譜對(duì)于化合物結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)確鑒定特點(diǎn),可同時(shí)達(dá)到定性定量的檢測(cè)目的。曹艷平等以氣相色譜一質(zhì)譜選擇離子監(jiān)測(cè)方式分析檢測(cè)蔬菜水果中12種有機(jī)磷和4種氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留,16種農(nóng)藥均在14min內(nèi)流出,分離良好,農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)的線性范圍在0.01 - 15ug/ml,相關(guān)系數(shù)r均在0.99以上,低、高二種濃度加標(biāo)回收率均在65.3% - 108.2%之間。
對(duì)照品網(wǎng)所有產(chǎn)品專供科研單位研究,不得用于臨床。中國中藥對(duì)照品網(wǎng)是一家以藥物單體分離純化和結(jié)構(gòu)研究為基礎(chǔ),進(jìn)行藥物品質(zhì)評(píng)價(jià)、標(biāo)準(zhǔn)研究、藥物制劑工藝開發(fā)等研發(fā)工作網(wǎng)站根據(jù)市場(chǎng)需求,采用現(xiàn)代化的提取理論、技術(shù)和設(shè)備,對(duì)傳統(tǒng)提取方法進(jìn)行技術(shù)改造和開發(fā)。提供各種化學(xué)品,中檢所對(duì)照品目錄查詢,包含標(biāo)準(zhǔn)品購買、植物提取物、中藥標(biāo)準(zhǔn)品購買,公司經(jīng)營對(duì)照品多達(dá)3000余種,植物提取物600種,標(biāo)準(zhǔn)品和植物提取物能滿足各種實(shí)驗(yàn)室需求www.brmmt.cn |
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