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電化學檢測在不同的領(lǐng)域幾個優(yōu)點 | |||
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ECD提供比傳統(tǒng)的熒光檢測在不同的領(lǐng)域,如以下幾個優(yōu)點:電源要求。ECD測量小電流或電壓,這樣一個大型的,昂貴的,沉重的電源功率光源。組件是沒有必要的。ECD不需要光源,反射鏡,過濾器,探測器,支持力學,或運動力學的芯片掃描等光學元件。因此,ECD系統(tǒng)簡單,成本更低,更少的組件的要求導致較小的腳印和更輕的重量。
可移植性。由于該儀器體積小,重量輕,功率可以由電池提供,ECD系統(tǒng)有可能成為便攜。這一特性將使ECD重大應用IVD市場小,價格低廉,便攜的系統(tǒng)是必要的。
性能在光檢測方案中,信號-噪聲比從入射光束的雜散光進入檢測器通道的量是有限的。幼兒有沒有事件背景。唯一存在的背景來自固有的背景電流的測量系統(tǒng)和在芯片的電容充電電流。由于這些電流是小的,較高的信號-噪聲比和更高的靈敏度,可以實現(xiàn)與ECD的模式。
由于ECD芯片分析系統(tǒng)的引入,其便攜性,成本低,可以改變和改進的性能不僅體外診斷試劑的應用,但傳統(tǒng)的研究和開發(fā)研究利用微陣列。有一種情況可能出現(xiàn)數(shù)組讀者可以采取任何地方,數(shù)以十萬計,而不是幾百塊錢購買頂級的一線光學掃描儀。
下面是四個ECD方法已在文獻中描述的微陣列應用的討論。9-19所有這些方法都具有空間是硬連接到單獨可尋址的電極陣列。通過測量獨立于各電極的電特性,在任何一個串行或并行的方式執(zhí)行掃描。
電容測量是由在一個表面的電容充電和充電或放電的表面附近的區(qū)域的能力的存在。從雜交的雙鏈DNA,在單鏈DNA中的表面的電容會有所不同。通過測量能力,可確定存在的混合動力(見圖1a)。
雖然這ECD系統(tǒng)在概念上是簡單的,不需要標簽,它是相當不敏感的和非特異性的,由于在溶液中的鹽和其他材料的干擾。觀察雙工和單鏈DNA之間的差異,在芯片的表面上,鹽和其它的解決方案組件需要被刪除,否則他們掩膜的信號。
通過DNA法拉第電流測量DNA是由有機和無機分子,可以阻止電流流動,它是已知的,比單鏈DNA,雙鏈DNA是一種較差的絕緣體。通過引入氧化還原對(例如,鐵氰化鉀/亞鐵氰化鉀)和測量的電流在不同的電極與連接的DNA,可以判定存在一個復式注意到在一個特定的施加電壓的電流增加(參見圖1b)。上面的方法類似,因為這是ECD系統(tǒng)解決方案組件的干擾非常敏感,在芯片的表面上發(fā)生的事件,可能難以區(qū)分。
ECD系統(tǒng)時,給出了最好的結(jié)果加上嵌入或溝結(jié)合的。嵌入劑結(jié)合到雙鏈DNA,但不是單鏈DNA。嵌入或槽的粘合劑可能是或可能不是序列特異性,嵌入劑可以是有機分子,如亞甲基藍,凋亡,或過渡金屬配合物組成的鈷。嵌入劑的存在使雙工更導電,從而導致更大的電流在電極,雜交發(fā)生的地方。此方法已取得了一些商業(yè)上的成功。13,15然而,其主要缺點是特異性和缺乏信號放大,作為數(shù)據(jù)收集在一個單一的采集周期。此外,在嵌入綁定到DNA雙鏈形成,有些人可能會喜歡某些核苷酸按特定的順序。
DNA的直接氧化某些ECD方法利用金屬如鋨或釕,氧化樣品的讀數(shù)時(參見圖2)。鳥嘌呤使用的釕配合物的氧化,并減少在電極氧化釕。所產(chǎn)生的信號被放大到一個小的程度基于本鳥嘌呤殘基的數(shù)目。在設計上,捕獲探針包含序列中鳥嘌呤有限,使單鏈DNA雜交,雙鏈DNA,此電化學技術(shù)區(qū)分。然而,樣本DNA被破壞,不能重復和數(shù)據(jù)采集。
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