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		氧化還原酶介導(dǎo)的測(cè)量

　　ECD法利用氧化還原酶的標(biāo)簽。9,19氧化還原酶提供信號(hào)指示雜交也相媲美的光學(xué)方法（參見(jiàn)圖3）的擴(kuò)增。雖然這種方法已被用于微陣列，它已被用于比色法酶聯(lián)免疫分析（ELISA）年。氧化還原酶也被用在商業(yè)上成功的血糖儀。此ECD的方法是簡(jiǎn)單的，商業(yè)上的成功，而且在技術(shù)上優(yōu)于上面討論的方法。該信號(hào)被放大，通過(guò)酶的作用，只有小的修改，傳統(tǒng)的基因表達(dá)的協(xié)議是必要的。

　　ECD輸出一個(gè)lambda秒殺實(shí)驗(yàn)（0.375pM 0.75pM，下午1時(shí)05分，中午12時(shí)至下午3時(shí)，上午9時(shí)至下午6時(shí)，下午12時(shí)）從白血病細(xì)胞株的生物素標(biāo)記的cRNA成一個(gè)復(fù)雜的樣品。盒裝黃色區(qū)域應(yīng)結(jié)合各種拉姆達(dá)穗DNA的。所示的擴(kuò)展版本的lambda結(jié)合的領(lǐng)域之一。其他在芯片上的探針是互補(bǔ)的基因，這是在這個(gè)特定的細(xì)胞系的任何明示或不表達(dá)的特定集合。二十四個(gè)重復(fù)測(cè)定各濃度范圍內(nèi)的（一個(gè)范圍示出在展開(kāi)的區(qū)域）。熒光和電子化數(shù)據(jù)有直接的關(guān)系目前正在進(jìn)行（點(diǎn)擊放大）。

　　COMBIMATRIX（華盛頓Mukilteo）正在開(kāi)發(fā)的商業(yè)系統(tǒng)，是基于這ECD方法和基于半導(dǎo)體的微電極陣列。的COMBIMATRIX系統(tǒng)可以針對(duì)每個(gè)單獨(dú)的電極和測(cè)量的信號(hào)出現(xiàn)在該電極部位。一個(gè)芯片上的一節(jié)，每平方厘米有大約1000個(gè)電極（見(jiàn)圖4a）。一個(gè)新的12K版本的芯片每平方厘米有13,000電極（見(jiàn)圖4b）。在這兩種芯片，每個(gè)電極單獨(dú)尋址，可以在每個(gè)站點(diǎn)有獨(dú)特的低聚物合成?？梢酝ㄟ^(guò)熒光或ECD方法雜交分析。

　　圖6。一個(gè)實(shí)際的ECD的原型，已開(kāi)發(fā)（一）。計(jì)算機(jī)生成圖像的手持式發(fā)展（二）根據(jù)ECD的原型。系統(tǒng)采用微流控技術(shù)，以幫助移動(dòng)樣品和探測(cè)器芯片解決方案（點(diǎn)擊放大）。

　　在COMBIMATRIX信號(hào)放大方法，所附的報(bào)告基團(tuán)通常是辣根過(guò)氧化物酶。在過(guò)氧化氫的存在下，氧化的酶底物向產(chǎn)物。作為回報(bào)，該產(chǎn)品是降低的適當(dāng)?shù)臈l件下，上面的電極。由于酶繼續(xù)創(chuàng)建產(chǎn)品以極快的速度，放大后的信號(hào)可以被檢測(cè)到的電流在電極。例如，為白血病細(xì)胞系中的基因表達(dá)實(shí)驗(yàn)顯示ECD的輸出的λ尖峰對(duì)照組（參見(jiàn)圖5）。的數(shù)據(jù)生成從13K芯片，芯片的特定區(qū)域中合成的，其中給定lambda值捕獲探針。檢出限為0.375 PM生物素化的lambda的cRNA。二十四個(gè)重復(fù)為每個(gè)拉姆達(dá)濃度與給定的序列。

　　COMBIMATRIX制作原型，并正在開(kāi)發(fā)一種更加緊湊，自動(dòng)化ECD系統(tǒng)（見(jiàn)圖6a和6b）。許多反應(yīng)組分，或前體，可以被存儲(chǔ)在一個(gè)干燥的格式。長(zhǎng)期穩(wěn)定性研究會(huì)進(jìn)行調(diào)查。

　　結(jié)論

　　這篇文章的目的是到現(xiàn)場(chǎng)全面檢討，而是提供新的檢測(cè)方法，有可能改變芯片的應(yīng)用，并催促他們使用的IVD市場(chǎng)的洞察。啟用ECD的優(yōu)點(diǎn)，有可能使微陣列無(wú)處不在的工具，不僅在研究和發(fā)展，而且臨床體外診斷試劑。

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