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室電化學(xué)電池的開發(fā)的化學(xué)氧化和碘化GFR標(biāo)記 | |||
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室電化學(xué)電池的開發(fā)的化學(xué)氧化和碘化GFR標(biāo)記的比色測定中的移動(dòng)設(shè)備甲流圖,示出了工作流的GFR標(biāo)志物檢測在血漿和尿液樣品。方框圖顯示了兩個(gè)平行的過程中,血漿和尿液分析的要求是略有不同的。當(dāng)血漿或牛血清白蛋白(BSA)混合,用高氯酸,必須通過離心除去形成的沉淀物,而尿液分析需要4-8倍的過硫酸氫鉀比血漿或BSA。否則,該過程是相同的。在BSA中的碘酞酸鹽的吸光度值接近一半的碘化物,其對應(yīng)于定量回收碘碘酞酸鹽。
與不同濃度的碘離子和碘酞酸鹽,4%BSA進(jìn)行測試的結(jié)果示于圖5。測量是在波長為390 nm,碘酞酸鹽樣品的吸光率值的那些碘化物的樣品在相同濃度的值的一半左右。由于約一半(47%),泛影葡胺,碘酞酸鹽的分子量為碘,這樣的結(jié)果表明碘釋放定量的碘酞酸鹽的電化學(xué)過程。
檢測碘化GFR標(biāo)記血漿中的采用最優(yōu)化的參數(shù)(參見圖4)的測量在4%BSA濃度摻入人血漿樣品中的碘酞酸鹽,成功地檢測到。各500μL的血漿樣品,和4%的高氯酸中加入到離心管中,渦旋混合,并在15,000 rpm下離心一分鐘,以分離沉淀的蛋白質(zhì)。800微升的上層清液的等分試樣溶液用移液管到的二室電化學(xué)電池的樣品室中。白金線圈電極被放置到另一個(gè)室,分離的Nafion膜,填充有4%的高氯酸和pH 7.4的PBS緩沖液中的1:1混合物中。
清潔和鉍電極放入樣品室,樣品溶液用磁力攪拌器攪拌。甲穩(wěn)壓電源的應(yīng)用鉍電極3.6 V到五分鐘,之后的200微升等分試樣的電解溶液通過裝有0.5毫克的過硫酸氫鉀制劑,然后通過PVP涂層膜的玻璃微纖維過濾器首先通過。碘酞酸鹽的量存在于樣品中的碘PVP配合物的吸光度測量。在圖6中示出對于人血漿樣品加標(biāo)0,10,20,50,100 ppm的碘酞酸鹽,基線校正的吸光度在390nm處。此濃度范圍內(nèi)的線性擬合表明,相關(guān)系數(shù)為0.981,0.026 ppm的截距。
尿液中檢測碘化GFR標(biāo)記用于檢測人血漿中的碘酞酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線。顯示的值是三次運(yùn)行的平均值,該地塊是取值范圍為0-100 ppm的碘酞酸鹽中的數(shù)據(jù)的線性擬合。
由于與等離子相比,可以忽略不計(jì)的尿液中的蛋白質(zhì)濃度,尿液樣本不需要離心。但是,尿液樣品,加有碘酞酸鹽未能開發(fā)優(yōu)化的血漿樣品的條件下進(jìn)行測試時(shí),任何顏色。這一結(jié)果產(chǎn)生的氧化劑(0.5毫克的過硫酸氫鉀制劑中裝入玻璃微纖維過濾器)被完全消耗的尿素本尿樣中,造成不完全氧化釋放出碘酞酸鹽碘化物。的尿液樣本中的碘酞酸鹽濃度可以成功地測量玻璃過濾器上加載的氧化劑的量翻兩番。
平均基線校正在390 nm處的吸光度,得到三組尿液樣本中添加了0 - ,10 - ,20 - ,50 - ,和100 ppm的碘酞酸鹽的值繪于圖7。雖然此圖是非線性的,在當(dāng)前的發(fā)展階段,高度的再現(xiàn)性(小誤差棒)得到。因此,此圖可用于準(zhǔn)確地檢測尿樣中碘酞酸鹽研究的濃度范圍內(nèi)。
結(jié)論
日益增長的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)負(fù)擔(dān)造成CKD GFR標(biāo)志物在病人身邊的情況下快速檢測要求測試方法。一個(gè)簡單的,廉價(jià)的設(shè)備,它使用一次性盒,Lynntech的電比色技術(shù),使得它可以量化準(zhǔn)確碘化GFR標(biāo)志物在臨床設(shè)置在血漿和尿液樣本。使用這種方法,在血漿和尿液中的碘酞酸鹽可以迅速而準(zhǔn)確地確定在小于10分鐘。
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