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基本的免疫學(xué)研究和診斷分析酶聯(lián)免疫吸附試驗 | |||
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酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)是一種最廣泛使用的技術(shù)在這兩個基本的免疫學(xué)研究和診斷分析。 因為ELISA使多肽、蛋白質(zhì)、抗體、激素是選擇性地檢測到的濃度很小在大量的其他物質(zhì)與相對較低的成本和高簡單,該方法提供了一個重要的和有用的工具,用于疾病監(jiān)測、診斷、興奮劑檢測、環(huán)境和食品分析。 ELISA方法產(chǎn)量都敏感和準(zhǔn)確的結(jié)果,采用自動處理與一個微型板塊平臺允許快速傳導(dǎo)的測試在一個高通量的方式。
盡管ELISA方法被用于廣泛的不同測定法(如。 ,直接、間接、三明治、競爭),所有的變量都是基于同樣的原則:綁定一個分析組件(如。 、抗原或特定的抗體)到固體表面,它的選擇性相互作用與隨后的補(bǔ)充分析組件。 分子,不專門與組件綁定到固體表面,洗去了在分析過程。
綁定的抗原或抗體標(biāo)記或與一個酶,直接或間接,測定了添加一個酶底物產(chǎn)生一個可測量的信號(如。 、放射性、比色、熒光或發(fā)光)。 特定的綁定的抗原和抗體可以被可視化通過合適的探測系統(tǒng),信號的強(qiáng)度與被分析物的量內(nèi)部提供樣品,使的手段定量。
兩個酶的標(biāo)簽,在今天仍然廣泛使用辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(美聯(lián)社)。 當(dāng)連體與化學(xué)襯底、一個比色反應(yīng)生產(chǎn),合成的顏色可以測量通過吸光度或光學(xué)密度度數(shù)在分光光度計。
當(dāng)ELISA測試最初發(fā)達(dá),檢測的抗原和抗體之間的相互作用主要是基于放射性同位素標(biāo)記。 自那時以來,標(biāo)記方法已大大擴(kuò)大到包括酶或fluorophores,導(dǎo)致一個轉(zhuǎn)變,從放射化學(xué)檢測的分光光度法,熒光,或chemoluminescent儀器方法。 這些更新的檢測方法可以產(chǎn)生同樣敏感的結(jié)果與用放射化學(xué)方法獲得的,沒有與工作相關(guān)的問題與放射性材料,如生成和處理放射性廢物生物。
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